组织RNA小提试剂盒(R6311)
Tissue RNA Miniprep Kit
货号 | 规格 | 目录价 |
BW-R6311-01 | 50 T | 1071.00 |
BW-R6311-02 | 250 T | 4549.00 |
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描述
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常见问题
本试剂盒采用独特的缓冲液系统,结合膜吸附原理,适用于从各种组织或培养细胞中分离纯化总RNA。
产品特点:
1)应用范围广,适用于多种不同实验样品;
2)简单快速,30分钟内可从各种组织、细胞中提取高质量的总RNA;
3)整个过程无需酚氯仿抽提,操作安全;
4)提到的总RNA完整性好,稳定性高,可直接用于Northern杂交、RT-PCR、MicroArray、Real-Time PCR等下游分子实验。
问题1:得率低
原因1:样本中RNA已经降解,建议采集样品后快速液氮冷冻并储存于-70℃,防止样本中RNA降解,或者使用新鲜的样本。
原因2:样本不新鲜或者样本过量导致裂解不充分,建议减少组织样品的加入量。
原因3:RNA wash Buffer 中未加入等比例乙醇,建议按照试剂盒说明书要求加入等比例的无水乙醇。
问题2:纯度差
原因1:蛋白质污染,建议可增加BufferRB再一次洗涤
原因2:盐类污染,建议如后端提取RNA有盐类污染,可加入2.5倍体积的乙醇和0.1M的NaCl(终浓度)来沉降RNA,-20℃孵育30min,4℃,10,000×g离心15min,用DEPCtreatedddH2O重悬RNA沉淀。
问题3:基因组污染
原因1:RT-PCR加入过量RNA,建议减少RT-PCR反应时,RNA加入过量量,RNA加入量应控制在50-100ng。
原因2:样本富含DNA。减少样品初始使用量,30mg左右的样本样品初始使用量大多会出现基因组污染的情
况。减少细胞数目到1-2×10*5,增加buffer的使用量,分批次多上几次RNA柱子。